Медицина.

Для того чтобы увидеть микроорганизмы, их необходимо окрасить. Существуют простые и сложные способны окрашиванию микроорганизмов. При простом способе окрашивания на мазок наносится один краситель, при сложном способе окрашивания - 2 или более красителей. К таким способам окрашивания относится окраска по Граму. Соответственно выделяют формы бактерии грамположительные ( окрашиваются в фиолетовый цвет ) и грамотрицательные ( окрашиваются в красный цвет ). Грамположительные бактерии имеют не сложно организованную, но мощную клеточную стенку, состоящую из множественных слоев пептидогликана, включающих уникальные полимеры тейхоевых кислот. Грамотрицательные батерии имеют более тонкую клеточну Вую стенку,включающую бимолекулярный слой пептидогликана и не содержащую тейхоевой кислоты.

Приготовление маска из зубного налета.

1. Небольшое количество зубного налета снять острым концом спички.

2. Растереть на предметном стекле размером с пятикопеечную монету.

3. Мазок зафиксировать путем трехкратного проведения над пламенем горелки.

4. Мазок окрасить по Граму.

5. Промыть водой.

6. Высушить фильтрованная бумагой и на воздухе.

7. Микроскопировать.

Окраска препарата по Граму.

1. Небольшое количество генцианвиолета налить препарат; время окраски - две минуты.

2. Избыток краски слить в лоток, на препарат нанести пипеткой несколько капель раствора Люголя на одну минуту.

3. На препарат налить несколько капель спирта, обесцвечивание проводить до отхождения фиолетовых капель - струи краски, но не более 30 секунд.

4. Мазок тщательно промыть водой.

5. Мазок докрасить разведенным фуксином - две минуты .

Микроскопирование препарата.

1. Установить освещение : конденсатор должен быть поднят до упора, настройку производить объективом малого увеличения 8 - х необходимо белое освещённое поле.

2. Препарат поместить на предметный столик.

3. Макровинтом опустить объектив на расстоянии 0,5 см от препарата.

4. Глядя в окуляр, получить изображение препарата, вращая макровит против часовой стрелки ( на себя ).

5. Произвести точную фокусировку с помощью микровинт.

6. Переместить револьвер на большое увеличение ( объектив 40 - х ) и провести дефокусировку только микровинтом.

7. После просмотра препарата перевести револьвер на увеличение 8 - х ( малое ) и только после этого снять препарат с предметного столика.

Кроме окраски по Граму к сложным и дифференциальным методам окраски относятся :

1. Краска кислотоустойчивых бактерий по Цилю -Нильсену

* Фиксированный на пламени горелки мазок окрашиваются 3 - 5 минут раствором карболового фуксина Циля или окрашенной фуксином бумажкой с подогреванием до появления паров, но не доводя краску до кипения ;

* Дают препарату остыть, бумажку снимают, сливают избыток краски, препарат промывают водой ;

* Окрашенный препарат обеспечивает 5% H2SO4 ( серной кислотой ) в течение 3 - 5 секунд или 96 ° этиловым спиртом, содержащим 3% по объёму соляной кислоты, несколько раз погружая в стаканчик с раствором ;

* После обесцвечивания остаток кислоты сливают, препарат промывают водой ;

* Докрашивают дополнительно метиленовой синью Леф - флера 3 - 5 минут, промывают водой, и подсушивают и микроскопируют.

Результаты окраски: При окраски препаратов по методу Циля - Нильсена кислотоустойчивые бактерии окрашиваются фуксином в красный цвет.

2. Окраска по Романовскому - Гимзе

Краска Романовского - Гимзы состоит из смеси азура, эозина и метиленовой сини. Перед употреблением к 10 мл дистиллированной воды прибавляют 10 капель краски Романовского - Гимзы. Приготовленный раствор краски наносят на фиксированный мазок и оставляют на 1 час. Затем краску сливают, препарат промывают водой и высушивают на воздухе. Краска Романовского -Гимзе окрашивает микробы в фиолетово - красный цвет.